拟南芥VSP2蛋白的重组表达及其酸性磷酸酶活性的测定
Bacterial expression and acid phosphatase activity of VSP2 from Arabidopsis thaliana
摘要通过PCR扩增从拟南芥cDNA文库中得到VSP2蛋白的编码序列,将其构建到原核表达载体pET-22b上,并在大肠杆菌BL21茵株中实现高效可溶表达.经过Ni-NTA亲和层析一步纯化,获得电泳纯的重组VSP2蛋白.以pNPP为底物检测,该蛋白具有酸性磷酸酶活性,反应的最适pH值4.5,最适温度为45℃,Km值为26.2mM.重组VSP2蛋白表达量高,纯化后均一性好,适于蛋白晶体生长.
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关键词
拟南芥VSP2蛋白克隆表达酸性磷酸酶活性晶体生长Arabidopsis thaliana VSP2clone and expressionacid phosphatase activitycrystal growth
分类号
Q754
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.2095-1736.2009.06.016
发布时间
2010-03-02
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