换一批摘要通过质粒提取、PCR扩增构建F3一PE40表达载体转化大肠杆菌,然后进行表达纯化.以pEKH-F3质粒为模板,PCR扩增F3片段,将F3插入克隆质粒PQE80L,转化大肠杆菌,筛选获得含有F3的PQE80L重组载体.提取绿脓杆菌菌株染色体DNA为模板,PCR扩增绿脓杆菌外毒素A催化区(PE40).然后将PQE80-F3和PE40重组,得到表达PQE80L-F3-PE40载体.转化至大肠杆菌DH5a,BL21,表达融合蛋白F3-PE40.大肠杆菌表达了融合蛋白F3-PE40,表达的融合蛋白量占菌体总体蛋白量的20%.成功地表达了融合蛋白F3-PE40,为进一步大规模表达、纯化F3-PE40功能奠定了基础.
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DOI
10.3969/j.issn.1008-9632.2010.04.049
发布时间
2010-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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