一种适用于RT-PCR的石榴籽粒总RNA提取方法
An improved method for extracting total RNA used to RT-PCRfrom seeds of pomegranate
摘要为从石榴籽粒中提取高质量的RNA,以便进行后续分子生物学研究,针对石榴籽粒富含次生代谢物的特点,采用CTAB法并进行了改良,利用氯仿/异戊醇替代其他方法中的"异硫氰酸胍"和"Trizol试剂"进行反复抽提去除蛋白,无水乙醇去除多糖,LiCl消化DNA.结果显示:改良CTAB 法提取的石榴籽粒总RNA的28S rRNA、18S rRNA条带清晰,完整性较好; OD260 nm/OD280 nm比值为1.9960,纯度较高.在此基础上通过反转录、PCR扩增出符合预期大小的Actin基因片段,表明该方法提取的RNA可满足后续RT-PCR等分子生物学试验研究.
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