换一批
换一批混合培养基模式培养杂交瘤细胞表达单克隆抗体
Monoclonal antibodies production by hybridoma cell culture based on mixed medium model
摘要采用混合培养基模式将杂交瘤细胞进行减血清悬浮驯化培养，通过优化提高单克隆抗体的表达量，并进行抗体的分离纯化。在杂交瘤细胞悬浮培养优化过程中，最终确定的血清浓度为2％胎牛血清，培养基配比为RPM1640∶SFM4CHO∶OptiCHO（4.5∶4.5∶1），接种密度为3×105 cells／mL，采用批次补料流加培养，每2 d流加1次，每次流加量为初始体积的3％，抗体的表达量从原始的84 mg／L提高到168 mg／L。将其进一步在5 L搅拌式生物反应器中进行培养，离心后上清经protein A亲和层析纯化，确定抗体的产量为240 mg／L。
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关键词
杂交瘤细胞培养单克隆抗体悬浮驯化亲和层析hybridoma cell culturemonoclonal antibodysuspension domesticationaffinity chromatography
分类号
R392
栏目名称
技术方法
DOI
10.3969/j.issn.2095-1736.2016.06.104
发布时间
2016-12-30
基金项目
国家863课题资助
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