换一批
换一批恒河猴miR-125a-3p慢病毒载体的构建、鉴定以及功能研究
Construction,identification and function of recombinant lentivirus vector for rhesus miR-125a-3p
摘要构建携带miR-125a-3p过表达与抑制表达shRNA的慢病毒,研究miR-125a-3p对轮状病毒感染乳鼠导致的腹泻的影响,为进一步研究miR-125a-3p对轮状病毒增殖过程中的影响及探究其机制提供前期研究基础.设计miR-125a-3p前体序列及其反向互补序列,与慢病毒骨架质pLVshRNA-EGFP(2A)Puro载体进行酶切连接,构建过表达与抑制表达miR-125a-3p的慢病毒表达载体.利用HEK293Ta细胞包装慢病毒颗粒,测定病毒滴度后,将获得的miR-125a-3p过表达慢病毒颗粒感染MA104细胞和灌胃感染乳鼠,检测miR-125a-3p的表达.同时对乳鼠进行轮状病毒攻毒试验,观察腹泻情况.研究成功构建了过表达及抑制miR-125a-3p表达的慢病毒载体,获得高效的过表达及抑制miR-125a-3p的慢病毒颗粒,成功感染MA104细胞,以及在乳鼠小肠组织有表达.同时发现miR-125a-3p过表达慢病毒感染乳鼠后对轮状病毒引起的腹泻有明显的抑制作用.
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关键词
miR-125a-3p慢病毒过表达载体抑制表达载体乳鼠miR-125a-3plentivirus vectoroverexpression vectorsuppression vectorsuckling mice
分类号
Q78
栏目名称
研究报告
DOI
10.3969/j.issn.2095-1736.2017.03.001
发布时间
2017-06-30
基金项目
十二五重大新药创制
中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目
云南省应用基础研究计划项目
云南省科技计划项目
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