换一批轮状病毒NSP5真核表达载体的构建、鉴定及功能研究
Construction, identification and functional study of the eukaryotic expression vector of rotavirus NSP5
摘要研究轮状病毒(Rotavirus,RV)非结构蛋白5(NSP5)在体外对RV复制的作用.以质粒pEGFP-N2为载体构建出可特异性表达重组蛋白NSP5的真核表达载体后,将重组质粒转染MA104细胞并分别通过免疫荧光和West-ern Blot检测NSP5在转染后不同时间的表达差异.随后,重组质粒转染组及对照组细胞分别接种相同剂量的RV,一定时间后根据GFP分布来确认重组蛋白NSP5在细胞内的迁移变化情况,并比较实验组和对照组之间的RV复制能力差异.结果发现,NSP5蛋白在重组质粒转染细胞48 h后表达达到顶峰.此外,GFP也显示NSP5蛋白随RV的感染从弥散状转变为点状聚集,且转染该重组质粒的细胞内RV复制水平明显高于对照细胞.说明了轮状病毒NSP5对病毒的复制具有明显促进作用,这也为深入了解RV的感染、复制及致病机理提供理论基础.
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10.3969/j.issn.2095-1736.2019.06.012
发布时间
2019-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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