换一批
换一批摘要CRISPR多基因编辑系统在动植物中已被广泛应用.为了在乳腺癌细胞中构建一套多基因编辑系统,利用内源性tRNA自剪切特点,将tRNA与小向导RNA(sgRNA)进行串联组合实现基因编辑,并在MCF7乳腺癌细胞中对KLF4、MYC、SOX2和OCT44个转录因子同时调控,在基因水平、蛋白表达以及功能改变3个层次验证该多基因编辑系统的功能性与可靠性.实验结果显示被调控的转录因子在细胞内的表达量提高2倍以上,侵袭能力明显增强,细胞的存活率提高50％,干细胞比例由2.57％提高到18.5％.同时,该系统在SUM149PT细胞系也被验证成功.综上,一套基于CRISPR的标准、精确、可复制、高效、可靠的多基因调控系统首次在乳腺癌细胞中构建成功.
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DOI
10.3969/j.issn.2095-1736.2020.02.001
发布时间
2020-04-27
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