换一批
换一批摘要根据毕赤酵母Sut2基因表达在甲醇培养基中显著升高的特性,进一步探究该基因的功能及其与甲醇代谢的关系.在毕赤酵母基因组中,利用同源重组原理,分别通过双交换和单交换构建Sut2敲除菌株与Sut2过表达菌株.同时培养GS115-ΔSut2、GS115-Sut2和GS115野生型菌株,检测并比较Aox1基因的转录和翻译水平.以甲醇和甲醛分别作碳源培养菌株,检测Sut2的转录水平,从而鉴定该基因的诱导剂.用高效液相色谱法(HPLC)检测毕赤酵母菌株细胞内外麦角固醇含量.结果显示:Sut2主要由甲醇所诱导,对Aox1有一定程度的正调控作用,但两个基因可能参与复杂的调控网络和反馈回路,因而间接相互作用;HPLC结果表明,Sut2基因可能与麦角固醇合成有关.探究Sut2对甲醇代谢的调控机理,进一步丰富了巴斯德毕赤酵母甲醇代谢通路.
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