换一批摘要利用CRISPR/Cas9 技术构建瞬时受体电位M2(TRPM2)基因敲除的杂合子小鼠模型.参考Ensembl数据库中Trpm2-203 的内含子 2 和内含子 24 序列选择sgRNA靶点并进行体外合成.通过体外转录方式获得Cas9 mR-NA,将其与sgRNA显微注射至C57BL/6J小鼠的受精卵后,移植到假孕母鼠的输卵管内,获得F0 代小鼠.阳性F0代小鼠分别与野生型C57BL/6J小鼠交配获得F1 代.结果显示,经PCR产物测序共获得 3 只阳性F0 代小鼠;阳性F0 代小鼠分别与野生型C57BL/6J小鼠交配获得 4 个品系,共获得 27 只阳性F1 代小鼠.通过实时荧光定量PCR和Western Blot方法验证,表明研究成功构建TRPM2 基因敲除杂合子小鼠(TRPM2+/-),为下一步开展TRPM2 基因及其表达产物的生物功能研究提供良好的动物模型.
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DOI
10.3969/j.issn.2095-1736.2023.04.114
发布时间
2023-08-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
河北省第二期现代农业产业技术体系蛋肉鸡创新团队建设专项经费项目（HBCT2018150207）
河北省自然科学基金资助项目（C2022405008）
河北省自然科学基金资助项目（C2022405010）
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