换一批CRISPR/Cas9优化E.coli MG1655的L-Arg合成途径及代谢组学分析
Optimization of the anabolic pathway and metabolomic analysis of L-arginine in E.coli MG1655 using CRISPR/Cas9
摘要以大肠杆菌MG1655为起始菌株(M0),采用CRISPR/Cas9基因组编辑技术对L-精氨酸合成基因簇进行优化.首先,敲除鸟氨酸脱羧酶基因speC和speF以增加精氨酸前体物鸟氨酸的供应,然后整合谷氨酸棒状杆菌来源基因簇argCJBDF失活精氨酸脱羧酶基因adiA以期阻断L-精氨酸的降解,同时加强L-精氨酸的外源合成途径,得到重组菌株M1(MG1655ΔspeCΔspeFΔadiA∷argCJBDF).结果显示,重组菌株M1中精氨酸产量达1.35 g/L,与M0菌株相比提高0.88 g/L.利用非靶向代谢组学技术对2个菌株的代谢产物进行比较分析,结果表明,重组菌株M1中精氨酸代谢途径及其相关代谢产物浓度发生相应的变化,影响了精氨酸、赖氨酸等氨基酸类、有机酸类等多种代谢物的合成.研究为后续针对性地调控这些旁路代谢途径,构建高产L-精氨酸工程菌株提供了研究思路和方向.
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关键词
大肠杆菌MG1655L-精氨酸基因编辑优化工程代谢组学E.coli MG1655L-argininegene editingoptimization engineeringmetabolomics
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.2095-1736.2025.05.040
发布时间
2025-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（21967018）
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