换一批摘要为实现红景天苷绿色高效制备,在前期分子改造获得糖基转移酶高效突变体TW(S129T/F168W)的基础上,构建双酶偶联一锅法催化酪醇合成红景天苷反应体系,对温度、pH、尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)、蔗糖、酪醇、金属离子和双酶比例进行优化,在最优条件下进行分批补料反应,实现尿苷二磷酸葡萄糖(uridine diphos-phate-glucose,UDPG)的循环再生,提高红景天苷产量.结果表明:双酶偶联催化酪醇合成红景天苷最佳条件为温度 35℃,pH 8.0,UDP浓度0.5 mmol/L,蔗糖浓度 1 mol/L,酪醇浓度 5 mmol/L,Ca2+浓度 5 mmol/L,突变体 TW:AtSuSy的酶活比0.5∶6;在10 mL反应体系中通过分批补料策略获得10.3 g/L的红景天苷.结合分子对接探究突变体催化酪醇合成红景天苷分子机制,为绿色高效制备红景天苷奠定基础.
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关键词
糖基转移酶红景天苷双酶偶联UDPG再生分批补料glycosyltransferasesalidrosidetwo-enzyme couplingUDPG regenerationfed-batch
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DOI
10.3969/j.issn.2095-1736.2025.05.075
发布时间
2025-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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