换一批摘要mRNA 疫苗凭借高效免疫保护及灵活靶向设计优势,迅速成为全球公共卫生与精准医疗领域的革命性技术.加帽率检测是 mRNA 技术从实验室走向工业化应用的质量基石,其精度与效率直接决定药物的安全性、有效性及生产成本.现有加帽率检测方法在准确性、效率、成本及规模化应用方面仍有不足.为探索 mRNA 疫苗质量控制的新策略,本研究通过筛选新型特异性探针及简化下游纯化方式对现有核糖核酸酶 H(RNase H)分析方法进行完善与创新.共设计 17 个具有不同长度和起始位点的探针,通过 RNase H 酶切和液相色谱-质谱(LC-MS)法进行特异性筛选.随后,利用筛选出的探针与底物 mRNA 退火杂交,采用 RNase H 切割杂交链中的 mRNA.切割产物经硅胶柱分离,小片段进一步通过 LC-MS 分析计算得出加帽率.结果显示,筛选到 3 个不同长度探针,能特异性诱导 RNase H 在-2 位点进行高效切割,切割频率大于 99%.硅胶柱纯化技术有效实现了对短片段的分离,成功剔除了长片段对实验结果的潜在干扰.该方法应用于 mRNA 加帽率检测,结果稳定在 97%左右.新型特异性探针以其高效、精准及高性价比,适用于 mRNA 疫苗加帽率质控检测.
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分类号
Q71（生物大分子的结构和功能）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.2095-1736.2026.02.097
发布时间
2026-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
上海市科学技术委员会国际合作计划项目（19410711000）
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