人胚神经干细胞的分离、培养与鉴定
Isolation, Cultivation and Identification of Neural Stem Cell from Human Embryonic CNS
摘要为了探讨人胚神经干细胞体外培养条件和分化情况,摸索出一种切实可行的获得较纯、多潜能人胚神经干细胞的方法.我们取三月龄人胎脑,用胰蛋白酶消化法分离单个细胞,部分冻存,另一部分进行细胞培养,加EGF、bFGF刺激生长,有限稀释法获得单细胞克隆,血清诱导分化,并用免疫组化方法进行鉴定.结果显示,EGF和bFGF同时存在的无血清培养基中有大量神经干细胞团生成,含血清培养基则诱导神经干细胞分化成为神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞.这表明,神经干细胞的存活和分裂有赖于EGF和bFGF的共同作用.经冻存后的胎脑细胞同样能分离培养出有活性的神经干细胞.
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