换一批人源性抗乳腺癌Her-2/neu噬菌体单链抗体库构建
Construction of a phage single-chain antibody library human-derived anti-breast cancer Her-2/neu
摘要目的 构建乳腺癌患者抗Her-2/neu全人源性噬菌体单链抗体可变区(ScFv)文库,筛选抗Her-2/neu单链抗体.方法 收集40例乳腺癌患者前哨淋巴结(SLN),提取总RNA,反转录为cDNA作模板,在目前常用的引物基础上重新设计可变区的引物,用PCR扩增全套抗体可变区,构建T载体库.并改造pCANTAB-5E构建了pCANTAB-Linker.将T载体库酶切连接人pCANTAB-Linker构建出scFv文库.最后构建噬菌体单链抗体库并进行初级筛选.结果 成功改良ScFv文库的构建方法.初步得到12株对人乳腺癌组织有高亲和力的Her-2/neu单链抗体.结论 改良了ScFv文库的构建方法,可以获得较大库容量的单链抗体库,并从中筛选到人源性抗Her-2/neu单链抗体.
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分类号
R394（医学遗传学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1009-7090.2010.02.020
发布时间
2010-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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