活细胞内基于Diels-Alder反应的量子点标记蛋白质研究
Protein labeling with quantum dots in live cells based on Diels-Alder reactions
摘要目的 建立一种基于Diels-Alder环加成反应用于活细胞内量子点(quantum dots,QDs)标记蛋白质的新方法. 方法 反式环辛烯(trans-cyclooctene 2,TCO2)修饰的类转录激活因子效应物(transcription activator-like effectors,TALE)蛋白与偶联四嗪(tetrazine 1,Tzl)的红色量子点QD625在Vero活细胞内特异性结合,形成量子点荧光标记的蛋白TALE-QD625,通过激光共聚焦显微镜观察TALE-QD625在Vero细胞内的荧光信号分布. 结果 基于Tzl和TCO2的Diels-Alder环加成反应在Vero活细胞内将QD625标记至TALE蛋白,并随TALE进入细胞核内,在核内观察到红色的QDs荧光信号,成功建立活细胞内量子点标记蛋白方法. 结论 通过Diels-Alder环加成反应首次实现活细胞内量子点标记蛋白,为蛋白单分子成像提供一种新的标记方法.
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