miRNA-30e-5p抑制骨肉瘤细胞增殖、转移的机制研究

Inhibitory effect of miRNA-30e-5p on the proliferation and metastasis of osteosarcoma cells and its mechanism

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摘要目的观察miRNA-30e-5p对骨肉瘤U2OS细胞增殖和转移能力的影响及其分子机制.方法 qRT-PCR检测骨肉瘤组织和癌旁正常组织、人成骨hFOB细胞和骨肉瘤U2OS、Saos-2、MG-63细胞中miRNA-30e-5p的表达水平.通过脂质体转染构建U2OS细胞miRNA-30e-5p过表达模型和miRNA-30e-5p敲低模型,用克隆形成和CCK-8实验检测不同处理组细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞转移能力.Targetscan网站在线预测miRNA-30e-5p的下游靶基因并通过Western blot验证.Western blot检测miRNA-30e-5p对E-cadherin和N-cadherin蛋白表达的影响.结果与癌旁正常组织比较,miRNA-30e-5p在骨肉瘤组织中低表达(P<0.05);与人成骨hFOB细胞相比,miRNA-30e-5p在骨肉瘤细胞中低表达(P<0.05).过表达miRNA-30e-5p降低骨肉瘤U2OS细胞增殖、转移能力(P<0.05).敲低miRNA-30e-5p表达增加骨肉瘤U2OS细胞增殖、转移能力(P<0.05).生物信息学预测USP22为miRNA-30e-5p的下游靶基因.过表达miRNA-30e-5p抑制USP22蛋白表达,敲低miRNA-30e-5p促进USP22蛋白表达.miRNA-30e-5p能降低E-cadherin蛋白表达、升高N-cadherin蛋白表达.结论 miR-NA-30e-5p能够抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖、转移能力,其机制可能与抑制USP22蛋白表达相关.