miR-205-5p靶向CDKN1 C调节滋养层细胞生物学行为的研究
The miR-205-5p regulates the biological behavior of trophoblast cells by targeting CDKN1C
摘要目的 探究miR-205-5p靶向细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子1C(cyclin-dependent kinase inhibitor 1C,CDKN1C)在调节滋养层细胞生物学行为中的作用.方法 双荧光素酶报告检测miR-205-5p与CDKN1C的靶向关系.滋养层细胞系HTR-8/SVneo细胞分为NC组、miR-205-5p mimic组、miR-205-5p inhibitor组、CDKN1C组和miR-205-5p mimic+CDKN1C组.qRT-PCR及Western blot检测Bax、Bcl-2及TGF-β1的表达.Western blot检测上皮间质转化相关因子Vimentin、N-cadherin及E-cadherin的表达,MTT检测细胞增殖情况,Transwell检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞的凋亡情况.结果 CDKN1C被证实为miR-205-5p的靶基因.qRT-PCR及Western blot检测发现,与NC组比较,miR-205-5p inhibitor组和CDKN1C组Bcl-2和TGF-β1表达上升,Bax表达下降,Vimentin和N-cadherin的蛋白水平表达上升,E-cadherin表达下降(均P<0.05),细胞的增殖与侵袭能力上升,凋亡率下降(均P<0.05).与NC组比较,miR-205-5p mimic组中Vimentin和N-cadherin的蛋白水平表达下调,E-cadherin表达上调,细胞的增殖、侵袭能力削弱,细胞凋亡增加(均P<0.05).相对于miR-205-5p mimic组,miR-205-5p mimic+CDKN1C组细胞增殖和侵袭增加,凋亡减少,提示过表达miR-205-5p的作用能够被CDKN1C过表达逆转.结论 抑制miR-205-5p表达能够促进HTR-8/SVneo细胞系中CDKN1C的表达,促进HTR-8/SVneo细胞的增殖和侵袭能力,miR-205-5p/CDKN1C可能是子痫前期治疗的潜在靶点.
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