ELF3在宫颈癌组织中的表达及对HeLa细胞增殖的影响
Expression of ELF3 in cervical cancer and its effect on the proliferation of HeLa cells
摘要目的 探讨ELF3在宫颈癌组织中的表达及其对HeLa细胞增殖能力的影响.方法 通过数据库资料挖掘、免疫组化染色(IHC)、Western blot及qRT-PCR分析ELF3在正常宫颈及宫颈癌组织中的表达情况,同时分析ELF3的表达量与患者预后的关系.采用分子克隆技术构建ELF3过表达质粒pIRES2-AcGFP1-Neo-ELF3.将ELF3过表达质粒与空质粒(pIRES2-AcGFP-Neo)分别转染至HeLa细胞中,并借助G418筛选转染成功的HeLa细胞.将转染了ELF3过表达质粒和空质粒的HeLa细胞分别命名为HeLa-ELF3组和HeLa-GFP组.采用细胞计数和CCK-8法检测ELF3对HeLa细胞增殖能力的影响.采用流式细胞术分析ELF3对HeLa细胞周期的影响.利用GEPIA数据平台初步分析ELF3与细胞周期相关基因CDK2、MCM2、CREPT表达水平的相关性.结果 与正常宫颈组织相比,宫颈癌组织中ELF3 mRNA及蛋白的表达量均显著上调(P<0.05).并且,ELF3 mRNA表达水平与患者的无复发生存期(RFS)正相关(P=0.019).成功构建了稳定过表达ELF3的HeLa细胞株.与HeLa-GFP组相比,HeLa-ELF3组细胞增殖能力和细胞活力均显著提高(P<0.05).HeLa-ELF3组处于G0/G1期的细胞比例低于HeLa-GFP组(P<0.05),而处于S期及G2/M期的细胞比例显著高于HeLa-GFP组(P<0.05).此外,ELF3与细胞周期相关分子CDK2、MCM2及CREPT分子的表达量正相关(r>0,P<0.05).结论 ELF3在宫颈癌组织中高表达,其表达量与宫颈癌患者的无复发生存期正相关.过表达ELF3加速HeLa细胞G0/G1期向S期转变,促进HeLa细胞增殖,该作用可能与CDK2、MCM2、CREPT等分子的表达上调有关.
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