摘要目的 探究慢性中耳炎(chronic otitis media,COM)小鼠中Treg细胞与炎症发展之间的关系.方法 采用不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)腹腔注射和中耳咽鼓管(ET)阻断的方式诱导构建慢性中耳炎小鼠模型(模型组),选择健康BALB/c小鼠作为对照组.分别在建模后第3,14,28,56天分离收集小鼠中耳积液和中耳黏膜组织,通过苏木精-伊红(HE)染色检测MEM病理变化,采用免疫组织化学染色评估CD4+和Foxp3+T细胞水平,ELISA和Western blot分别检测小鼠中耳积液和中耳黏膜组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-10和转化生长因子(TGF-β)水平,流式细胞术分析CD4+CD25+Foxp3+细胞比例.另取COM模型小鼠分为PBS组和抗-CD25组.抗-CD25组小鼠腹腔注射抗CD25 mAb模拟体内Treg耗竭,PBS组小鼠腹腔注射等量PBS溶液,第56天收集小鼠中耳积液、中耳黏膜组织、脾脏和颈部淋巴结组织,检测分析脾脏、颈部淋巴结和中耳黏膜组织中CD4+CD25+Foxp3+细胞比例,中耳黏膜组织中炎性因子水平,以及中耳积液中细菌水平.结果 HE结果显示,对照组小鼠中耳黏膜组织正常,模型组小鼠中耳黏膜组织出现炎性细胞浸润,细菌数量、炎性细胞数量和黏膜厚度均增加(P＜0.05).与对照组比较,模型组小鼠中耳黏膜组织中CD4+CD25+Foxp3+细胞比例升高(P＜0.05),中耳积液和中耳黏膜组织中炎性因子IL-1 β、TNF-α、IL-10和TGF-β的水平均升高(P＜0.01).与PBS组比较,抗-CD25组小鼠中耳黏膜组织、脾脏和颈部淋巴结组织中CD4+CD25+Foxp3+细胞比例均降低(P＜0.05),中耳积液中细菌数和中耳黏膜组织中炎性因子IL-1β、TNF-α、IL-10和TGF-β的水平均降低(P＜0.01).结论 Treg细胞在慢性中耳炎的炎症平衡维持中具有重要作用,抑制炎症的进展,但过度的Treg细胞抑制了宿主对细菌的清除作用.