摘要目的 探究黏蛋白5B(MUC5B)对分泌性中耳炎(SOM)炎症反应的调控作用,以及与中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)形成的关系.方法 采用腹腔注射卵清蛋白构建SOM大鼠模型,随机分为模型组、shRNA-NC组和shRNA-MUC5B组,每组10只,另取10只健康SD大鼠作为对照组.末次注射完成后24 h,进行大鼠炎症评分,采用HE染色检测大鼠中耳黏膜组织病变,ELISA法检测中耳灌洗液中炎性因子的表达,流式细胞术检测Th1和Th2细胞分布比例,免疫荧光染色检测中耳黏膜组织中NETs标志物髓过氧化物酶(MPO)和瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)的表达,DCFH-DA探针检测中耳黏膜组织中ROS水平.RT-qPCR检测MUC5B基因的表达水平,Western blot检测干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-13、MUC5B、MPO、CitH3和中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,模型组和shRNA-NC组大鼠表现出中耳黏膜增厚,炎症程度评分升高(P<0.05);中耳黏膜组织中MUC5B mRNA水平,CitH3、MPO、MUC5B、IL-4和IL-13蛋白水平,Th2细胞比例以及ROS水平均升高(P<0.05),IFN-γ和IL-2蛋白水平以及Th1细胞比例和Th1/Th2比值均降低(P<0.05);中耳灌洗液中MPO、NE和CitH3蛋白水平以及IL-4和IL-13含量均升高(P<0.05),IFN-γ和IL-2含量以及IFN-γ/IL-4比值均降低(均P<0.05).与shRNA-NC组比较,shRNA-MUC5B组大鼠中耳黏膜厚度和炎症程度评分均降低(P<0.05);中耳黏膜组织中MUC5B mRNA水平,CitH3、MPO、MUC5B、IL-4和IL-13蛋白水平,Th2细胞比例以及ROS水平均降低(P<0.05),IFN-γ和IL-2蛋白水平以及Th1细胞比例和Th1/Th2比值均升高(P<0.05);中耳灌洗液中MPO、NE和CitH3蛋白水平以及IL-4和IL-13含量均降低(P<0.05),IFN-γ和IL-2含量以及IFN-γ/IL-4比值均升高(P<0.05).结论 MUC5B敲低表达可以缓解SOM大鼠中耳黏膜组织炎症反应,该作用可能与抑制NETs的形成有关.