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和肝汤颗粒对功能性消化不良大鼠肠道菌群和TLR4信号通路的影响

Effects of Hegantang granules on intestinal microbiota and TLR4 signaling pathway in rats with functional dyspepsia

摘要目的 探索和肝汤对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)的作用机制是否与肠道菌群以及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)信号通路有关.方法 18只6周龄SD大鼠随机分为正常组、模型组以及和肝汤组,每组6只.模型组与和肝汤组大鼠以夹尾应激法建立FD模型,造模后和肝汤组予0.918 g生药/100 g体质量的和肝汤灌胃7 d,干预结束后取十二指肠组织和盲肠内容物,荧光定量PCR检测TLR4基因转录水平,蛋白印迹法检测TLR4蛋白表达水平,免疫荧光和免疫组化法观察TLR4的表达位置,16S rRNA和液相色谱-质谱联用分析盲肠内容物中菌群和代谢物情况.结果 与正常组比较,模型组TLR4蛋白表达水平显著增加(P<0.01);与模型组比较,和肝汤组TLR4表达下调(P<0.05).免疫荧光和免疫组化显示,TLR4在各组十二指肠固有层和上皮层均存在表达.模型组相比正常组阳性着色增强(P<0.01),和肝汤组相比模型组阳性着色减弱(P<0.01);但各组TLR4基因转录水平无显著差异(P>0.05).与正常组比较,模型组盲肠内容物中疣微菌门丰度增加(P<0.05),而厚壁菌门丰度减低(P<0.05);与模型组比较,和肝汤组拟杆菌门丰度提升(P<0.05),疣微菌门丰富下调(P<0.05);各组间n-γ-谷氨酰谷氨酰胺等代谢物含量存在一定差异(P<0.05).结论 FD大鼠十二指肠TLR4表达上调,同时肠道菌群和代谢产物的结构存在异常改变.和肝汤可通过调节肠道菌群和代谢产物的结构,下调TLR4在十二指肠的表达改善FD.

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