TRIM32在宫颈癌中的表达及其对HeLa细胞增殖、迁移及侵袭的影响
Expression of TRIM32 in cervical cancer and its effect on proliferation,migration and invasion of HeLa cells
摘要目的 探讨三结构域蛋白32(tripartite motif-containing proteins 32,TRIM32)在宫颈癌患者中的表达情况,及其对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及侵袭的影响及作用机制.方法 收集20例新鲜宫颈癌组织及癌旁正常组织,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot检测两种组织中TRIM32表达;同时收集85例患者宫颈癌及癌旁正常组织蜡块,免疫组化检测TRIM32表达量,统计患者临床病理资料,分析TRIM32表达与临床特征之间的相关性.采用qRT-PCR及Western blot检测人宫颈癌细胞系HeLa、MS751、SiHa及人正常宫颈上皮细胞HUCEC中TRIM32表达水平.人源宫颈癌HeLa细胞分为空白对照组(control组)、空载体组(si-NC组)、siRNA TRIM32干扰组(si-TRIM32组),采用qRT-PCR法检测转染效率.利用克隆形成实验、划痕愈合实验及Transwell实验分别检测HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力;Western blot检测JAK2/STAT3信号通路蛋白(p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、Ki-67 和 c-Myc)表达情况.结果 qRT-PCR及Western blot检测发现,宫颈癌组织中 TRIM32表达量明显较癌旁正常组织升高(P<0.05).免疫组化同样发现,宫颈癌组织中TRIM32表达量明显高于癌旁正常组织(P<0.05),且TRIM32的表达与肿瘤大小、FIGO分期和淋巴结转移有关(P<0.05).与HUCEC细胞相比,HeLa、MS751、SiHa细胞中TRIM32表达水平均升高(P<0.05).si-TRIM32组TRIM32表达量明显低于control组及si-NC组(P<0.05),证明转染成功.与control组和si-NC组相比,si-TRIM32组HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力均显著降低(P<0.05),p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、Ki-67和c-Myc蛋白表达均显著降低(P<0.05).结论 TRIM32在宫颈癌中表达显著增高.敲低TRIM32表达抑制HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力,这可能与抑制JAK2/STAT3信号通路进展相关.
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