亚硫酸钠对与脂肪细胞共培养的肝细胞脂肪代谢的影响
Effect of sodium sulfite on hepatic lipid metabolism in a hepatocyte-adipocyte co-culture system
摘要目的 探讨亚硫酸钠(Na2SO3)是否通过干扰脂肪细胞脂联素分泌进而影响肝细胞的脂肪代谢.方法 将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞.用完全培养基(阴性对照)、不同浓度Na2SO3(0.02,0.1,0.5,2.5 mmol/L)和1 mmol/L油酸(OA,阳性对照)处理脂肪细胞、单独培养HepG2细胞和共培养HepG2细胞.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定脂肪细胞培养上清中游离脂肪酸(FFA)和脂联素含量;采用甘油-3-磷酸氧化酶-过氧化物酶偶联法(GPO-POD)测定甘油三酯(TG)含量;采用免疫印迹法(Western blot)检测TG代谢相关蛋白固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FASN)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPKα)、肉碱酯酰转移酶1(CPT-1)的相对表达水平.结果 与阴性对照相比,Na2SO3各处理组脂肪细胞培养上清中FFA含量明显减少(P<0.001),脂联素的含量明显减少(P<0.01).2.5 mmol/L Na2SO3可引起共培养HepG2细胞内TG含量增加(P<0.001).Western blot结果显示,在单独培养组,与阴性对照相比,各浓度Na2SO3处理后,SREBP-1c、p-ACC、AMPKα、CPT-1无明显变化(P>0.05);2.5 mmol/L Na2SO3处理后,ACC和FASN蛋白表达增高(P<0.05).在共培养组中,与阴性对照相比,各浓度Na2SO3 处理组ACC和AMPKα的蛋白表达均增高(P<0.05).结论 较低剂量Na2SO3暴露不会引起肝细胞内TG的增加.较高剂量的Na2SO3(2.5 mmol/L)可能通过对脂肪细胞脂联素分泌的抑制作用引起肝细胞中TG明显升高.
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