SYBRGreen荧光定量PCR检测HTLV-I前病毒tax基因方法的建立
Quantitative Detection of HTLV-I Proviral Gene tax Using Real-time PCR with SYBRGreen
摘要目的 建立HTLV-I前病毒tax基因的荧光定量PCR检测方法.方法 根据HTLV-I tax基因序列设计引物,将PCR克隆的tax片段链接入质粒载体.经筛选鉴定后,以含有目的片断的质粒为阳性模板建立实时荧光定量检测方法.结果 扩增体系的敏感度可达10拷贝/反应.模板浓度在105~101拷贝/反应时,模板浓度与循环阚值(Ct)之问相关性良好,相关系数r=-0.998 7,且模板浓度相同的反应管之间具有良好的重复性和稳定性.结论 SYBRGreen荧光定量PCR检测HTLV-I前病毒tax基因方法具有简便、快速和灵敏度高等优点,可能在疾病诊断、监测以及血液筛查中具有一定的应用前景.
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