换一批人CDK14基因表达荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用
Establishment and Preliminary Application of the Method for Detecting Expression of Human CDK14 with Real-Time Quantitative PCR
摘要目的 建立一种人细胞周期蛋白依赖性激酶14(CDK14)基因表达荧光定量PCR检测方法.方法 利用Trizol法提取不同人肺癌细胞株中总RNA,以β-Actin和CDK14分别为内参和目的基因,分别设计特异性扩增引物,建立人CDK14基因表达荧光定量PCR检测系统并评估其检测性能.同时将其应用于不同细胞系siRNA干扰前后的CDK14基因相对表达水平检测.结果 经电泳分析、熔解曲线、产物测序确认人CDK14基因表达荧光定量PCR检测系统已建立,其特异性良好,重复性佳(CV=7.13％),线性范围较宽(CDK14与β-Actin分别在Ct值范围22.47～32.96与15.14～27.55间具有良好的相关性,r2=0.9844.).利用该体系检测发现:在HCC827 D5和H1650细胞中CDK14基因高表达;在1～3号干扰片段中,1号片段为有效片段.结论 人CDK14基因表达荧光定量PCR检测方法已成功建立.
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分类号
Q503（生物化学一般性问题）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1671-7414.2017.02.007
发布时间
2017-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广东省中医药局科研项目（(20161179)）
广州市卫计委医药卫生科技项目（(20161A011086)）
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