摘要目的 建立免疫磁珠(immunomagnetic beads,IMB)荧光染色法并评估其在临床痰液标本结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)检测的应用价值.方法 利用IMB富集纯化结核分枝杆菌,利用自动染色机和自动显微镜智能软件扫描系统进行荧光染色及结果分析,建立结核分枝杆菌IMB荧光染色法.用实验室培养的标准菌株评估该方法的检测灵敏度和特异度.同时选取2021年5月～2022年2月在山东省第二人民医院就诊的145例疑似肺结核患者作为临床研究对象,取每例患者的痰液标本,选用萋-尼氏(Ziehl-Neelsen,Z-N)抗酸染色法、IMB荧光染色法和BACTEC 960系统培养法检测结核分枝杆菌感染情况,比较三种方法的阳性检出率、灵敏度、特异度和准确率,验证IMB荧光染色法在诊断结核分枝杆菌感染中的优势和临床应用价值.结果 IMB荧光染色法的最低结核分枝杆菌检测量是30 CFU/ml,在标本含菌量≥30 CFU/ml时,该方法学的敏感度为100％;而在10 CFU/ml时则降到56％,该方法检测的特异度为100％.在利用临床标本检测中,IMB荧光染色法、Z-N抗酸染色法和培养法对于结核分枝杆菌的阳性检出率分别为73.10％,40.69％和78.62％;IMB荧光染色法的阳性率明显高于传统Z-N抗酸染色法的阳性率,差异具有统计学意义(χ2=31.0599,P<0.05);略低于培养法,差异无统计学意义(χ2=1.2052,P>0.05).IMB荧光染色法在临床标本检测中的灵敏度、特异度和准确率分别为92.98％,100.00％和94.48％,明显高于Z-N抗酸染色法的灵敏度、特异度和准确率(47.37％,83.87％和55.17％),差异具有统计学意义(χ2=56.6647,5.4386,P<0.05;59.4792,均P<0.05).结论 研究建立的IMB荧光染色法优于目前应用的其他染色法,可为结核病早期诊断提供新方法.