摘要目的 研究维莫非尼(VEM)对肠道病毒A组71型(EV-A71)的体外抑制作用及可能机制.方法 以EV-A71病毒和人横纹肌肉瘤(RMS)细胞系CCL-136为研究对象,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测药物细胞毒性;致细胞病变效应(CPE)抑制实验评估VEM对EV-A71感染后CCL-136细胞的保护作用;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测培养上清中的病毒载量和细胞中病毒基因组复制水平;药物作用时间实验分析VEM对EV-A71复制周期的影响;蛋白质印迹(Western blot)检测病毒组装水平和Raf蛋白激酶(Raf)/丝裂原激活蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)通路相关蛋白表达.结果 与0μmol/L VEM和瑞德西韦(REM)相比,11.11～100μmol/L VEM和REM处理后CCL-136细胞存活率逐渐降低,差异具有统计学意义(F=62.874、94.632,均P＜0.001).0.05～100μmol/L VEM和REM处理后EV-A71诱导的CCL-136细胞CPE形成抑制率逐渐升高,差异具有统计学意义(F=62.874、94.632,均P＜0.001).与对照组相比,0.05～100μmol/L VEM处理后EV-A71感染CCL-136细胞的病毒载量逐渐降低(F=473.847,P＜0.001).与EV71组相比,病毒感染-1～4h时,EV71+VEM组培养液上清液中病毒滴度降低,差异具有统计学意义(t=4.698～42.114,均P＜0.05);病毒感染-1～8h时,EV71+VEM组上清液和胞质中病毒mRNA水平及衣壳蛋白(VP)2/VP0比值均降低,差异具有统计学意义(tmRNA=45.098、101.451,tVP2/VP0=6.839、23.552,均 P＜0.01).各组干预2、4、6和 8h后,与 EV71 组相比,EV71+VEM组细胞中磷酸化(p)-MEK和p-ERK水平升高,差异具有统计学意义(tP-MEK=11.455～19.305,tP-ERK=5.196～25.497,均P＜0.05).结论 VEM可能通过激活Raf/MEK/ERK通路,抑制EV-A71病毒基因组复制和组装,发挥抗病毒活性.