换一批
换一批摘要目的:研究HCV NS5A区基因的结构与功能,为提高干扰素(IFN)治疗HCV感染的有效性提供依据,及为建立以NS5A蛋白做抗原的新一代诊断试剂盒,提高HCV感染检出率作出有益的尝试.方法:以含HCV1b全长cDNA的质粒HCV17为模板,利用巢式PCR扩增出一段长约500bp的cDNA片段,以此基因片段作为目的基因,进行T-A克隆,构建PMD18-T-NS5A.结果:经酶切及测序证实,PMD18-T-NS5A质粒中的插入基因片段为HCV1b NS5A区部分基因,与HCV标准株HCVJ序列进行比对分析,核苷酸和氨基酸序列的同源性均为90%以上,并且该区段包含了干扰素敏感决定区(ISDR).结论:建立HCV NS5A基因片段稳定的无性繁殖系,并进行同源性分析对研究ISDR序列与IFN疗效的关系是非常重要的;通过基因重组表达NS5A蛋白,可用于HCV诊断试剂盒的研究.
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主题词
基因(Genes)肝炎病毒属(Hepacivirus)序列比对(Sequence Alignment)肝炎病毒(Hepatitis Viruses)变态反应和免疫学(Allergy and Immunology)
分类号
R3
栏目名称
论著·临床研究
DOI
10.3969/j.issn.1000-7377.2006.11.002
发布时间
2006-12-05
基金项目
国家自然科学基金
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