PPA Rγ上调大鼠心肌细胞中 miR-148b表达不依赖于转录水平
PPARγup-regulated miR-148b expression in H9 C2 cells of rats is not dependent on the transcriptional level
摘要目的:探讨 PPARγ是否能上调大鼠心肌细胞中 miR‐148b表达,以及PPARγ上调miR‐148b表达是否依赖于转录水平。方法:利用吡格列酮刺激大鼠 H9 C2心肌细胞PPARγ激动,应用GW9662特异性拮抗大鼠心肌细胞PPARγ激动。采用Real‐time PCR法检测大鼠H9 C2心肌细胞中miR‐148b表达水平;利用生物信息学方法分析miR‐148b启动子区域的PPARγ结合位点;应用染色质免疫共沉淀法(ChIP)验证PPARγ是否与miR‐148b启动子结合。结果:吡格列酮剂量依赖性上调miR‐148b表达(P<0.01);吡格列酮上调miRs‐148b表达后,给予PPARγ特异性拮抗剂GW9662,上调的miR‐148b表达降至对照水平(P<0.01);生物信息学预测miR‐148b启动子区域存在PPARγ的两个结合位点;应用ChIP实验验证转录因子PPARγ不能与miR‐148b启动子区域的两个预测结合位点结合。结论:PPARγ上调大鼠心肌细胞中miR‐148b表达,但调控不依赖于转录水平。
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