持续高糖状态对Kv11.1离子通道蛋白表达的影响
Effect of continuous high glucose on the expression of Kv11.1 ion channel protein
摘要目的:探讨持续高浓度葡萄糖干预对Kv11.1离子通道蛋白表达的影响.方法:①采用双酶切法和基因重建技术将HERG基因插入到表达绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-N1中,构建Kv11.1离子通道蛋白的表达载体pEGFP-N1-HERG并测序验证.②pEGFP-N1-HERG表达载体鉴定成功后经脂质体转染HEK293T细胞,并通过不同糖浓度(5、17.5、30 mmol/L)干预细胞48 h后流式细胞仪检测细胞HERG离子通道蛋白绿色荧光平均表达量.结果:流式细胞仪检测pEGFP-N1-HERG融合蛋白平均荧光强度于不同浓度葡萄糖持续干预后分别为218.87(5 mmol/L)、174.83(17.5 mmol/L)、142.90(30 mmol/L),三组间比较差异有统计学意义(均 P<0.05).结论:持续高糖状态抑制Kv11.1离子通道蛋白的表达,为糖尿病患者长期高糖状态时QT间期延长提供理论依据并奠定实验基础.
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