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补体因子H相关蛋白1促进巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α调控足细胞增殖和迁移实验研究

Complement factor H-related protein 1 promotes the secretion of TNF-α by macrophages and regulates podocyte proliferation and migration Experimental study

摘要目的:探讨补体因子 H 相关蛋白 1(CFHR1)通过巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)调控足细胞增殖和迁移的作用.方法:体外培养人单核巨噬细胞和人肾足细胞.巨噬细胞分为对照组和 CFHR1 干预组,分别进行牛血清白蛋白或CFHR1 重组蛋白干预 24 h,ELISA法测定上清液 TNF-α水平.足细胞分为空白组、TNF-α干预组、对照上清液干预组、CFHR1 上清液干预组、CFHR1 上清液+TNF-α中和抗体干预组.CCK8 法检测各组细胞增殖.Transwell法检测各组细胞迁移.Wb法检测各组细胞中相关蛋白变化.结果:巨噬细胞的 CFHR1 干预组上清液中TNF-α含量显著增加(P<0.05).与空白组比较,TNF-α干预组、CFHR1 上清液干预组的细胞增殖比率和迁移数量均显著降低(均P<0.05).与CFHR1 上清液干预组比较,CFHR1 上清液+TNF-α中和抗体干预组的细胞增殖比率和迁移数量均显著提高(均P<0.05).与空白组比较,TNF-α干预组、CFHR1 上清液干预组的足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)、足突蛋白(Podocin)、纤维状肌动蛋白(F-Actin)、整合素α3β1 蛋白(α3β1)表达均显著降低(均P<0.05).与CFHR1 上清液干预组比较,CFHR1 上清液+TNF-α中和抗体干预组的 Nephrin、Podocin、F-actin、α3β1 蛋白表达均显著增多(均P<0.05).结论:CFHR1 促进巨噬细胞分泌的TNF-α可显著抑制足细胞增殖水平和迁移能力,这可能是高浓度CFHR1 促进肾病综合征发展的途径.

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