换一批MSX1基因调控Wnt/β-catenin通路刺激成骨分化和骨形成机制实验研究
Mechanism of MSX1 regulating Wnt/β-catenin pathway to stimulate osteogenic differentiation and bone formation
摘要目的:探究同源盒基因1(MSX1)调控Wnt/β-catenin通路刺激成骨分化和骨形成的机制.方法:对MC3T3-E1细胞使用成骨诱导培养基(OIM)进行成骨培养,诱导分化后分为对照组、小干扰RNA-阴性对照组(sh-NC组)及sh-MSX 1组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MSX1及成骨相关基因[胶原蛋白Ⅰ型(Col1A1)、骨桥蛋白(OPN)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙蛋白(OCN)];流式细胞仪检测细胞凋亡率;茜素红S染色鉴定MC3T3-E1细胞钙化结节;检测ALP活性;Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白.进一步对MC3T3-E1细胞使用Wnt/β-catenin通路激动剂SKL2001后进行分组,分别为对照组、激动剂组、sh-MSX1组和sh-MSX1组+激动剂组,RT-qPCR检测成骨相关基因.结果:与诱导分化第0天比较,OIM以时间依赖性的方式升高了 MC3T3-E1细胞中MSX1 mRNA的表达.sh-MSX1组细胞凋亡率高于sh-NC组,ALP活性及钙化面积低于sh-NC组(均P＜0.05).sh-MSX1 组Col1A1、OPN、ALP 及OCN mRNA 表达低于sh-NC组,Wnt1、Wnt3a、β-catenin 蛋白表达低于sh-NC组(均P＜0.05).与对照组比较,激动剂组成骨相关基因表达升高,sh-MSX1组降低(均P＜0.05).sh-MSX1组+激动剂组成骨相关基因表达高于sh-MSX1组(均P＜0.05).结论:敲低MSX1可促进MC3T3-E1细胞凋亡,并通过抑制Wnt/β-catenin通路激活降低MC3T3-E1细胞成骨分化和骨形成能力.
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关键词
骨质疏松症同源盒基因1MC3T3-E1细胞成骨分化骨形成Wnt/β-catenin通路OsteoporosisMSX1MC3T3-E1 cellsOsteogenic differentiationBone formationWnt/β-catenin pathway
分类号
R-33（实验医学、医学实验）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1000-7377.2025.06.006
发布时间
2025-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81401806）
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