换一批CUL5基因的RNA干扰真核表达载体的构建
Construction of recombinant plasmid affecting CUL5 in gene translation by RNA interference
摘要目的:构建CUL5基因的RNA干扰真核表达载体,探索CUL5在鼻咽癌放射治疗中加速再增殖的作用.方法: 根据 GenBank数据库提供的 CUL5基因mRNA序列,按照Tuschl 设计原则,设计选择双链小干扰RNA( small interfering RNA,siRNA ) ,再设计合成为能表达其小发卡结构RNA(small hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与pGPU6/GFP/Neo质粒定向连接,构建真核表达载体,并进行限制性内切酶酶切和DNA测序鉴定.结果: 经限制性内切酶酶切和DNA测序证实质粒中插入的为所需序列,通过RT-PCR证实其能够干扰CNE2细胞的CUL5基因表达.结论: CUL5基因RNA干扰真核细胞表达载体的构建成功.
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分类号
R730（肿瘤学一般性问题）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1672-4992.2010.02.014
发布时间
2010-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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