换一批摘要目的：构建融合蛋白PEP-1-VP3的原核表达质粒，并进行诱导表达和蛋白纯化。方法：通过PCR方法自 PGEX -6P -1/TAT -VP3质粒中扩增 VP3基因，运用靶向克隆酶，将 VP3基因插入到线性载体pET15b-PEP-1，构建重组表达质粒pET15b-PEP-1-VP3，经测序证实构建成功后转化E. coli Rosetta，表达PEP-1-VP3融合蛋白，经Ni-NTA树脂亲和层析，纯化产物进行SDS-PAGE及Western blot分析鉴定。结果：成功构建PEP-1-VP3融合蛋白原核表达载体，表达并纯化了分子量为17.6kD的PEP-1-VP3融合蛋白。结论：PEP-1-VP3融合蛋白原核表达质粒的构建及目的蛋白的表达、纯化，为体内应用PEP-1-VP3融合蛋白进行抗肿瘤研究提供了理论基础。
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DOI
10.3969/j.issn.1672-4992.2014.10.08
发布时间
2014-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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