沉默CXCR4的表达逆转肺癌细胞顺铂耐药

Silencing CXCR4 expression reverses cisplatin resistance in lung cancer cells

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摘要目的:探讨沉默CXCR4对肺癌细胞顺铂耐药的影响,并研究其分子作用机制.方法:利用RT-qPCR测定肺癌耐药(A549/DDP)及药物敏感细胞株(A549)中CXCR4 mRNA的表达水平;利用Lipofectami-neTM 2000将siRNA-CXCR4转染至肺癌耐药细胞株中,RT-qPCR及蛋白质印迹法(Western blot)验证siRNA对CXCR4基因的靶向沉默效率;利用CCK-8法检测沉默CXCR4后肺癌耐药细胞的增殖活性;利用流式细胞仪测定沉默CXCR4后肺癌耐药细胞的凋亡率;利用MTT法测定沉默CXCR4后肺癌耐药细胞对顺铂的敏感性;利用Western blot实验测定沉默CXCR4后CYP1B1蛋白的表达水平.结果:RT-qPCR实验结果显示,肺癌耐药细胞株A549/DDP中CXCR4 mRNA的表达量显著高于药物敏感细胞株(P<0.01);体外转染siRNA-CXCR4可明显下调A549/DDP细胞株中CXCR4的表达(P<0.001);CCK-8实验结果显示,沉默CXCR4的表达抑制了A549/DDP细胞的增殖活性(P<0.01);流式细胞仪实验结果显示,沉默CXCR4的表达促进了A549/DDP细胞凋亡(P<0.01);MTT实验结果显示,沉默CXCR4的表达增加了A549/DDP细胞对顺铂的敏感性(P<0.01);Western blot实验结果显示,沉默CXCR4后CYP1B1蛋白的表达水平显著降低(P<0.05).结论:沉默CXCR4的表达抑制肺癌耐药细胞增殖、促进凋亡,逆转肺癌细胞顺铂耐药,CXCR4正向调控CYP1B1的表达,可能是CXCR4逆转肺癌细胞顺铂耐药的作用机制.