黄卡瓦胡椒素B促进EGFR的降解进而抑制H1975肺癌细胞的增殖和迁移
Flavokavin B promotes EGFR degradation and inhibits H1975 lung cancer cell prolifera-tion and migration
摘要目的:研究黄卡瓦胡椒素B对肺癌细胞H1975增殖及迁移的影响并探讨其机制.方法:培养H1975肺癌细胞株,用不同浓度的黄卡瓦胡椒素B处理细胞24、48和72 h后,采用CCK-8法检测黄卡瓦胡椒素B对H1975细胞增殖的影响.Transwell实验检测黄卡瓦胡椒素B对H1975细胞迁移能力的影响.Western blotting检测20μmol/L和40μmol/L黄卡瓦胡椒素B处理16 h后对H1975细胞EGFR-AKT信号通路相关蛋白表达的影响.采用qPCR技术检测黄卡瓦胡椒素B对H1975细胞EGFR mRNA水平的影响.Western blotting检测黄卡瓦胡椒素B对H1975细胞LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白表达的影响.CCK-8实验和Transwell实验分别检测黄卡瓦胡椒素B与EGFR小分子抑制剂联用对H1975细胞增殖和迁移的影响.结果:黄卡瓦胡椒素B在体外能抑制H1975细胞的增殖,且抑制作用呈浓度依赖性.黄卡瓦胡椒素B处理组细胞迁移数明显减少(P<0.05).Western blotting结果显示,使用黄卡瓦胡椒素B处理16 h后,H1975肺癌细胞的EGFR、p-AKT和AKT蛋白表达水平明显降低(P<0.05),但EGFR mRNA水平无显著改变.当巴佛洛霉素A1(Bafilomycin A1,BAF)或氯喹(Chloroquine,CQ)阻断自噬时,黄卡瓦胡椒素B诱导的对EGFR蛋白的抑制作用被逆转,并且10、20和40μmol/L黄卡瓦胡椒素B可促进H1975细胞LC3-Ⅱ蛋白表达.黄卡瓦胡椒素B与EGFR小分子抑制剂联用能够抑制H1975细胞的增殖和迁移以及p-EGFR和p-AKT的表达.结论:黄卡瓦胡椒素B通过促进EGFR的降解进而抑制H1975肺癌细胞的增殖和迁移.
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