miR-34s增强结直肠癌细胞对放射敏感性的作用研究
The study of miR-34s enhancing the radiosensitivity of colorectal cancer cells
摘要目的:探讨miR-34s对结直肠癌细胞放射敏感性的影响以及在电离辐射致DNA损伤中的作用.方法:利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative fluorescence PCR,qRT-PCR)检测miR-34a/b/c-5p在结直肠癌细胞中的表达水平,以及电离辐射后miR-34a/b/c-5p表达水平变化趋势.基于克隆形成法和单击多靶模型建立细胞存活曲线,分析miR-34a/b/c-5p对结直肠癌细胞放射敏感性的影响.过表达miR-34a/b/c-5p并进行照射,利用免疫荧光法检测照射后γH2AX焦点形成情况,进而分析miR-34a/b/c-5p对电离辐射致DNA损伤的作用.结果:miR-34a/b/c-5p在HCT116 细胞中的表达水平明显高于HT29 细胞(P<0.05).HCT116 细胞经4Gy照射后24h内,miR-34a/b/c-5p表达水平呈双峰变化趋势.与miR-NC组相比,过表达miR-34a/b/c-5p可显著增加结直肠癌细胞的放射敏感性,miR-34a/b/c-5p组细胞平均致死剂量(D0)和准阈值剂量(Dq)均明显降低,且辐射增敏比(SER)明显增加.过表达miR-34a/b/c-5p可显著增加电离辐射诱导的DNA双链断裂(double strand breaks,DSBs)水平,照射后1h和8 h γH2AX焦点数明显高于miR-NC组(P<0.05).结论:miR-34s为放射响应miRNA分子,过表达miR-34s可增加电离辐射诱导的DNA损伤水平并增强结直肠癌细胞的放射敏感性.
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