摘要目的:探究TRIM2 通过泛素化修饰PKM2 调控肝癌细胞糖酵解的机制.方法:TCGA和CPTAC数据库分析TRIM2 基因及蛋白表达水平,并结合病人生存状态进行相关性分析.构建HepG2-shNC和HepG2-shTRIM2 细胞株,细胞能量代谢仪检测两组细胞胞外酸化率和耗氧率,并测定细胞葡萄糖吸收率、乳酸产生量、ATP水平.免疫共沉淀验证TRIM2 和PKM2 在HepG2、HEK293T细胞中相互作用,免疫荧光检测PKM2 和TRIM2 共定位.免疫共沉淀检测在HepG2/HEK293T细胞中敲低/过表达TRIM2 后PKM2的泛素化修饰水平,体外酶催化反应检测在HepG2/HEK293T细胞中敲低/过表达TRIM2 后PKM2 酶活性.Transwell小室法检测 HepG2-shNC 和 HepG2-shTRIM2 细胞侵袭和迁移能力.皮下移植瘤实验检测HepG2-shNC和HepG2-shTRIM2 细胞体内成瘤能力.结果:TCGA和CPTAC数据库分析发现TRIM2 在肝癌组织中mRNA及蛋白表达水平均升高,高TRIM2 表达预示差的患者生存状态.TRIM2 表达水平与糖酵解通路相关性高,敲低 TRIM2 可抑制 HepG2 胞外酸化率,提高耗氧率,细胞葡萄糖吸收率[(100.000 0±2.000 0)%vs(46.666 7±8.144 5)%]、乳酸产生量[(99.000 0±3.605 5)%vs(43.666 7±10.016 65)%]、ATP水平[(97.000 0±3.605 5)%vs(57.333 3±6.658 3)%]均显著下调.TRIM2 与PKM2 在HepG2 细胞中相互作用且蛋白共定位.TRIM2 抑制后 HepG2 细胞中 PKM2 泛素化水平升高,PKM2 酶活性降低;在HEK293T细胞中表达Myc-TRIM2,下调PKM2 蛋白泛素化修饰水平,提高PKM2 酶活性.敲低TRIM2抑制HepG2细胞侵袭能力(1 vs0.506 7±0.116 8)、迁移能力(1 vs0.513 3±0.086 22),抑制细胞体内成瘤体积[(529.333 3±29.280 26)mm3 vs(281.666 7±25.696 9)mm3]和重量[(360.333 3±42.716 1)mg vs(172.166 7±50.284 9)mg].结论:TRIM2 在肝癌组织中高表达,通过去泛素化修饰PKM2促进其酶活性,进而调控肿瘤细胞糖酵解能力.