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川芎嗪通过RAD52调控乳腺癌细胞DNA损伤修复

Tetramethylpyrazine regulates DNA damage repair in breast cancer cells through RAD52

摘要目的:探究TMP对乳腺癌BT474 细胞增殖、细胞周期及其调控蛋白表达与DNA双链断裂修复通路的相关性.方法:CCK8 法测定TMP对乳腺癌BT474 细胞的增殖抑制情况;流式细胞术测定TMP对细胞周期的影响;单细胞凝胶电泳测定分析TMP对损伤后细胞DSBs累积情况的影响;Isce-I内切酶系统检测TMP对修复通路活性的影响;Western blotting检测DSBs修复通路相关染色体结合蛋白表达水平变化.结果:TMP通过使细胞阻滞在G1 期呈浓度依赖性抑制BT474 细胞增殖,显著减少体内由Zeocin导致的细胞拖尾DNA含量(P<0.05);TMP显著增加BT474 细胞对RAD52、ERCC1、XRCC4 以及DNA LigⅣ蛋白募集,减少对KU80 蛋白募集,促进了SSA以及NHEJ通路修复活性(P<0.05).结论:TMP通过阻滞BT474 细胞停留在G1 期使其发挥增殖抑制作用的机制之一;TMP通过增强损伤缺口对各个通路的关键染色体结合蛋白募集,促进SSA与NHEJ修复通路活性从而减少DNA损伤.

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