二烯丙基二硫通过磷酸化Chk1负调控Cdc25C/CyclinB1/CDK1通路阻滞白血病K562细胞G2/M期

Phosphorylated Chk1 by DADS blocks the G2/M phase of K562 cells via Cdc25C/Cy-clinB1/CDK1 pathway

二维码有效期 120s

摘要目的:研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病K562细胞周期阻滞及其分子机制.方法:采用CCK-8、细胞计数及流式细胞术观察DADS对K562细胞增殖与周期阻滞效应.Western Blot检测DADS对K562细胞PCNA、Chk1/2以及下游分子Cdc25C、CyclinB1与CDK1表达的影响.结果:CCK-8 检测显示,15μmol/L、30 μmol/L、60 μmol/L、120 μmol/L、240 μmol/L DADS 处理后,呈浓度依赖性抑制K562细胞增殖,抑制率分别为32.48％、59.34％、66.42％、77.06％、81.05％(P＜0.05).对照组与Tween80组无抑制作用(P＞0.05).细胞计数结果显示,30 μmol/L、60 μmol/L与120 μmol/L DADS处理K562细胞后,群体倍增时间分别为22.71±0.29、36.69±0.93与73.02±0.87呈浓度依赖性增加(P＜0.05),而Tween8 0组与对照组无明显差异(P＞0.05).流式细胞术检测显示,60 μmol/L与120 μmol/L DADS作用K562细胞24 h与48 h后,G2/M期百分率分别增加到17.6％与28.5％和18.6％与34.4％,较对照组有显著性差异(P＜0.05).60 μmol/L DADS作用K562细胞1 h、2 h、4 h、8 h和24 h后,PCNA表达呈时间依赖性表达下调(P＜0.05).p-Chk1表达呈时间依赖性上调(P＜0.05),而Chk1、Chk2与p-Chk2表达无明显差异(P＞0.05).并且,Cdc25C、CyclinB1和CDK1分别呈时间依赖性下调(P＜0.05),但是,14-3-3 蛋白无明显改变(P＞0.05).结论:DADS 可磷酸化 Chk1 通过 Cdc25C/CyclinB1/CDK1通路抑制K562细胞增殖与阻滞G2/M期.