CDK1基因对肝癌细胞HepG2、Huh7增殖、迁移的影响及作用机制

The effect and mechanism of CDK1 gene on proliferation and migration of hepatocellular carcinoma HepG2 and Huh7 cells

二维码有效期 120s

摘要目的:基于生物信息学分析探讨CDK1表达与肝癌预后、临床特征的相关性,并通过实验进一步探讨其对肝癌细胞HepG2、Huh7增殖和迁移的影响.方法:通过检索TIMER数据库和GEPIA数据库,分析CDK1基因在肝癌和正常肝组织中的表达差异.借助UALCAN数据库验证CDK1蛋白在肝癌中的表达水平,运用R软件分析CDK1在GSE45267、GSE121247数据集中表达情况,采用单因素、多因素回归分析CDK1与肝癌临床病理参数的关系及预后价值,采用GEPIA和Kaplan-Meier Plotter数据库分析CDK1的表达与肝癌患者生存率的关系.将肝癌细胞HepG2、Huh7分为对照组和si_CDK1组(细胞转染CDK1-in-hibitor),CCK-8法检测细胞增殖率,细胞划痕实验检测细胞愈合率,Transwell迁移实验分析计算细胞迁移数.通过LinkedOmics数据库探讨与CDK1共表达的正负相关基因,并进行通路富集分析.Western blot检测各组细胞中细胞周期、凋亡相关蛋白表达.结果:CDK1在肝癌组织中的表达显著高于正常肝组织,且CDK1为影响肝癌患者的独立危险因素,CDK1表达越高患者存活率和预后越差;CDK1共表达基因主要参与细胞周期、DNA复制等;与Control组相比,si_CDK1组肝癌细胞的增殖、愈合率和迁移能力明显降低,细胞周期蛋白CyclinD1、凋亡通路Bcl-2蛋白表达显著降低.结论:CDK1在肝癌组织中表达明显升高,并且与患者预后不良相关,沉默CDK1可以使肝癌细胞的增殖、迁移能力显著下降,引起细胞周期阻滞,促进细胞凋亡.