DADS下调DJ-1通过PTEN/Akt通路抑制人胃癌MGC803细胞侵袭与上皮-间质转化
DADS down-regulated DJ-1 inhibition of human gastric cancer MGC803 cell invasion and epithelial-mesenchymal transformation via PTEN/Akt pathway
摘要目的:探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)下调DJ-1通过PTEN/Akt通路抑制人胃癌MGC803细胞侵袭与上皮-间质转化的作用.方法:实验分为MGC803组、空载体组、DJ-1过表达组、MGC803+DADS组、空载体+DADS组、DJ-1过表达+DADS组.MTT、平板克隆、细胞划痕和侵袭实验检测DADS对MGC803细胞增殖、克隆形成、迁移与侵袭的影响;相差显微镜观察DADS对MGC803细胞形态学的影响;qRT-PCR、Western blot 与免疫荧光检测 DJ-1、PTEN、p-Akt、Snail、Vimentin、E-cadherin、MMP-9 与TIMP-3表达.结果:MTT显示,24 h、48 h和72 h后,DADS处理后,各组细胞的增殖率分别较处理前下降(P<0.05).平板克隆显示,DADS处理后,克隆形成数较处理前各组减少(P<0.05).划痕实验显示,24 h时,DADS处理后的划痕距离,分别较处理前各组增加(P<0.05).迁移实验显示,DADS处理后,各组的迁移细胞较处理前各组减少(P<0.05).侵袭实验显示,DADS处理后,侵袭细胞较处理前减少(P<0.05).DADS处理后,DJ-1表达较处理前下降(P<0.05),PTEN表达较处理前上调(P<0.05),免疫荧光与上述结果一致.DADS处理后,各组p-Akt表达下调(P<0.05).相差显微镜显示,DADS处理后,MGC803组与DJ-1过表达组异型性下降,Snail、Vimentin与MMP-9表达下调,E-cadherin与TIMP-3表达上调(P<0.05).结论:DADS下调DJ-1可负调控PTEN/Akt通路抑制人胃癌MGC803细胞侵袭与上皮-间质转化.
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