PAK5与p53竞争结合DDX5促进乳腺癌细胞的增殖
PAK5 and p53 competitively combine with DDX5 to promote the proliferation of breast cancer cells
摘要目的:探讨p21活化激酶-5(p21-activated kinase 5,PAK5)通过磷酸化修饰对DDX5与p53结合的影响和可能机制.方法:为了探究PAK5对DDX5与p53结合的影响,在过表达PAK5的乳腺癌细胞中,采用Co-IP验证DDX5与p53结合能力的变化,并在细胞外利用GST pulldown实验验证PAK5对DDX5与p53直接结合能力的影响.构建DDX5截短质粒,GST pulldown实验验证PAK5和p53与DDX5的结合结构域.构建DDX5磷酸化位点突变质粒,纯化不同磷酸化状态的DDX5蛋白,GST pulldown实验验证DDX5和p53的结合状态.Real-Time PCR实验证实PAK5抑制成熟的miR-143和miR-145的表达.最后,通过CCK-8实验检测过表达不同磷酸化状态的DDX5对乳腺癌细胞增殖的影响.结果:过表达PAK5减弱了 DDX5与p53的结合,促进乳腺癌细胞的增殖.结论:PAK5可能通过磷酸化DDX5,与p53竞争性结合DDX5,抑制成熟的miR-143和miR-145的表达,从而促进乳腺肿瘤的生长.
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