circRNA_100395通过调节miR-1228逆转前列腺癌细胞多西他赛耐药
circRNA_100395 reverses docetaxel resistance in prostate cancer cells by regulating miR-1228
摘要目的:探讨circRNA_100395 在前列腺癌细胞多西他赛耐药中的作用及其潜在机制.方法:体外培养前列腺癌PC-3 细胞,通过逐步增加多西他赛浓度的方法建立多西他赛耐药细胞株(PC-3/DTX).利用qRT-PCR检测耐药株PC-3/DTX中circRNA_100395 的表达水平;将慢病毒过表达circRNA_100395 载体转染至耐药株中,筛选出过表达的耐药株(PC-3/DTX/OE).通过CCK-8 实验检测PC-3/DTX/OE和PC-3/DTX细胞的增殖能力;通过Transwell实验检测其迁移和侵袭能力,并使用Western blotting检测上皮-间质转化相关信号通路蛋白的变化.通过双荧光素酶报告实验检测circRNA_100395 与miR-1228 的结合关系.在PC-3/DTX/OE和PC-3/DTX细胞中,使用诱导剂mimics上调miR-1228 的表达水平,再次通过CCK-8 和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化.结果:成功构建了多西他赛耐药细胞株(PC-3/DTX),且circRNA_100395 在PC-3/DTX中的表达量显著降低.成功构建并筛选出过表达circRNA_100395 的多西他赛耐药细胞株(PC-3/DTX/OE).过表达circRNA_100395 后,PC-3/DTX的增殖能力、迁移能力和侵袭能力均受到抑制,同时E-cadherin表达上调,而N-cadherin、Vimentin和Slug表达下调,表明上皮-间质转化受到抑制.上调PC-3/DTX/OE细胞内miR-1228 的表达后,能够逆转过表达circRNA_100395 对PC-3/DTX细胞的抗增殖、抗迁移和抗侵袭作用.结论:过表达circRNA_100395 可以抑制多西他赛耐药前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,这一效应可能与降低miR-1228 的表达有关.
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