青蒿琥酯通过调节miR-21/PTEN/AKT轴对甲状腺癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响
Effects of Artesunate on Proliferation,Migration and Apoptosis of Thyroid Cancer Cells by Regulating the miR-21/PTEN/AKT Axis
摘要目的 观察青蒿琥酯对甲状腺癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响及微小RNA(miRNA)-21 在该过程中的作用,并探讨相关机制.方法 取TPC-1 细胞,将miR-21 过表达质粒miR-21 mimics转染至TPC-1 细胞,随机分为mimics组、联合组,mimics组常规培养,联合组加入青蒿琥酯(320 μg/mL).另取TPC-1 细胞分为空白组、青蒿琥酯组,空白组常规培养,青蒿琥酯组加入青蒿琥酯(320 μg/mL).实时荧光定量聚合酶链反应(Real-Time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测细胞miR-21 表达量;MTT法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;划痕实验检测细胞迁移能力;双荧光素酶实验验证miR-21 与第十染色体同源丢失性磷酸酶和张力蛋白基因(PTEN)的靶向关系;免疫印迹法检测细胞PTEN、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT蛋白表达.结果 与空白组比较,青蒿琥酯组miR-21 表达量,24、48、72 h吸光度值,迁移率,p-AKT/AKT降低,凋亡率、PTEN蛋白表达量升高(P<0.05),mimics组miR-21 表达量,24、48、72 h吸光度值,迁移率,p-AKT/AKT升高,凋亡率、PTEN蛋白表达量降低(P<0.05);与青蒿琥酯组比较,联合组miR-21 表达量,24、48、72 h吸光度值,迁移率,p-AKT/AKT升高,凋亡率、PTEN蛋白表达量降低(P<0.05);与mimics组比较,联合组miR-21 表达量,24、48、72 h吸光度值,迁移率,p-AKT/AKT降低,凋亡率、PTEN蛋白表达量升高(P<0.05);双荧光素酶结果显示,PTEN是miR-21 的靶基因.结论 青蒿琥酯可抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移,并促进其凋亡,其作用机制可能与下调miR-21 进一步靶向调控下游PTEN/AKT轴表达有关.
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