三种小鼠肠道病毒多重PCR检测方法的建立和初步应用

Establishment and Preliminary Application of a Multiplex PCR Method for Detecting Three Types of Enterovirus in Mice

二维码有效期 120s

摘要目的建立一种同时检测小鼠细小病毒(MVM)、肝炎病毒(MHV)和诺如病毒(MNV)的多重 PCR检测方法.方法分别根据 MVM、MHV和 MNV 基因保守区应用软件设计特异性引物,构建在同一反应体系中可同时检测MVM、MHV和 MNV的多重 PCR检测方法,验证其特异性、敏感性及重复性,并进行初步检测应用.结果通过优化 PCR扩增条件成功建立多重 PCR检测方法,特异性实验结果表明,该方法可同时扩增 MVM、MHV 和 MNV 的目的片段,片段大小与预期相符,未出现非特异性片段;敏感性测试显示,MVM、MHV和 MNV三种病毒的最低检测下限为 102、104、102 copies/μL;重复性实验显示该方法在不同时间、不同场所应用的重复性稳定.应用该方法对 287份小鼠结肠匀浆样品进行检测,与单重 PCR检测结果完全一致.结论所建立的 MVM、MHV和 MNV三种病毒多重 PCR检测方法具有特异性高、敏感性强和重复性优的特点,适用于三种病原体感染的临床样品检测和大量样品的流行病学调查.