换一批白化黑线仓鼠皮肤黑色素细胞分离培养及功能分析
Isolation and Functional Analysis of Skin Melanocytes From Albino Chinese Hamsters(Cricetulus griseus)
摘要目的 建立白化突变黑线仓鼠(AL)及野生型黑线仓鼠(WT)皮肤黑色素细胞分离鉴定方法,分析黑色素合成功能及细胞增殖,为该自发白化突变动物模型白化致病机制研究提供理想的原代细胞模型.方法 取出生 3 d以内的仓鼠背部皮肤组织,胰蛋白酶消化法分离黑色素细胞,培养于 MelM 培养基;用免疫荧光染色、L-Dopa 染色、透射电镜等方法鉴定黑色素细胞,Masson-Fontana 染色及比色法测定黑色素含量,L-Dopa 催化法检测酪氨酸酶(TYR)活性,MTT、细胞周期分析及克隆形成测定细胞增殖.结果 黑色素细胞特异性蛋白 TYR、Pmel17 免疫荧光显示,分离的AL和WT皮肤黑色素细胞均表达;AL黑色素细胞L-Dopa染色明显浅于WT黑色素细胞,并且细胞内成熟期黑色素小体较少;AL黑色素细胞黑色素含量及 TYR 活性显著低于 WT 黑色素细胞(P<0.001);AL 黑色素细胞增殖速度明显快于 WT黑色素细胞(P<0.05),S期细胞比例显著升高(P<0.05),并且克隆形成能力明显增强(P<0.01).结论 胰蛋白酶消化法能获得性状稳定的白化突变黑线仓鼠皮肤黑色素细胞,该细胞黑色素合成减弱,但增殖能力增强.
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分类号
Q95-3（动物学的研究与实验）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1006-6179.2025.04.009
发布时间
2025-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
军队实验动物专项科研课题（SYDW(2020)10）
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