基于微量精子、胚胎样本的3种基因组提取方法的优化及比较
Optimization and Comparison of Three Methods for Total DNA Extraction From Sperm and Embryo Sample
摘要目的 优化并比较 3 种基因组提取方法对冷冻生殖细胞的提取效率.方法 用苯酚抽提法、柱式试剂盒和磁珠试剂盒经优化分别提取冷冻精子、胚胎样本基因组,通过荧光定量 PCR 比较以上 3 种方式提取效率.结果 1)3 种方式均可提取精子基因组,通过加入二硫苏糖醇(DTT)优化的柱式提取法对精子样本的基因组提取效率最高(P<0.05).2)柱式试剂盒和磁珠试剂盒可有效提取胚胎基因组,在提取微量胚胎时,DNA磁珠试剂盒相比柱式试剂盒得率较高(P<0.05).结论 在提取精子基因组时,可优先选用加入二硫苏糖醇(DTT)前处理的柱式提取法;在提取胚胎基因组时,可优先选用 DNA磁珠试剂盒,该研究为冷冻生殖细胞基因组提取提供了参考.
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