换一批人毛细淋巴管内皮细胞的分离、培养与鉴定
Isolation, Culture and Characterization of Endothelial Cells from Capillary Lymphantic Vessels of Human Skin
摘要目的:分离培养人皮肤毛细淋巴管内皮细胞(LECs),为进一步研究淋巴管生成在肿瘤转移扩散中的作用奠定基础.方法:采用胶原酶消化皮肤组织,血管内皮生长因子受体-3(VEG-FR-3)免疫微珠进行细胞分选,克隆柱纯化细胞.显微镜观察细胞形态及结构,免疫荧光检测细胞标志物表达.测定细胞生长曲线及VEGF-C蛋白对细胞生长的影响.结果:光镜下LECs呈卵圆形单层生长,有典型铺路石征;电镜下可见细胞核大,胞浆丰富,内有空泡,细胞器丰富;LECs标志物VEFGR-3、淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1(LYVE-1)、肾小球上皮细胞整合膜蛋白(Po-doplanin)、D2-40均为阳性表达,血管内皮细胞(BVECs)标志物VIII因子表达阴性;VEGF-C对LECs的促增殖作用明显.结论:联合使用酶消、抗体磁珠分选和细胞克隆柱纯化法,可以成功分离获得人毛细淋巴管内皮细胞.
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