换一批安石榴甙在机械力诱导成纤维细胞凋亡中的作用及其机制研究
Study on the Effect and Mechanism of Punicalagin on Mechanical Stress Induced Apoptosis in Fibroblasts
摘要目的:探索安石榴甙(PUN)在机械力诱导成纤维细胞凋亡中的作用及其可能机制.方法:不同浓度(0、2.5、5、10、25、50、100 μmol/L)的PUN处理L929细胞不同时间(12、24、48小时)后,采用CCK8法检测细胞增殖活性;采用Western blot检测不同浓度PUN(0、2.5、5、10、25 μmol/L)处理24小时后Nrf2蛋白表达;将L929细胞根据是否行PUN(10μmol/L,24小时)预处理和是否采用四点弯曲力学加载系统进行机械力干预(5333 μstrain,1 Hz,4小时)分为4组:空白对照组、加力组、PUN组及PUN加力组,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;采用Westem blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及caspase3的表达;采用H2DCF-DA荧光探针检测各组细胞内活性氧簇(ROS)水平的变化.结果:PUN在浓度10 μmol/L、作用时间24小时对细胞增殖活性及Nrf2蛋白表达的促进作用最显著;与对照组相比,加力组细胞凋亡率明显增加、ROS水平显著上升、Bax表达和Active-caspase3/caspase3比率明显增加(P＜0.05);与加力组相比,PUN加力组细胞凋亡率显著减少、ROS水平明显降低、Bcl2表达显著增加、Bax表达和Active-caspase3/caspase3比率降低(P＜0.05).结论:PUN可明显减少机械力诱导的成纤维细胞凋亡,其机制可能是通过上调抗氧化蛋白Nrf2的表达,从而抑制机械力诱导ROS水平上升所导致的氧化损伤.
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关键词
安石榴甙机械力压力性尿失禁氧化应激凋亡PunicalaginMechanical-traumaStress Urinary IncontinenceOxidative DamageApoptosis
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2017-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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